【正海新知】PCR实验室建设要求及防控建议

PCR实验室原则上分为4个单独的工作区域，由扩增前区到扩增后区，且要严格分开。实验材料、试剂、记录笔、纸、清洁材料等，只能从扩增前区流向扩增后区，即从试剂制备区--样品制备区---扩增区---扩增产物分析区，不得逆向流动。实验室的气流也应从扩增前区流动到扩增后区，不得逆向流动。各工作区域应设置缓冲间，工作间与缓冲间之间宜安装联锁装置。不同功能的核酸检验工作区应是分隔独立的工作室，并有明显的标志，各区间不能直通。各区之间如果是紧密相连，需安装物品 传递窗。每个工作区域的顶部应安装紫外灯，紫外灯的波长为254nm。

实验室较为理想的布局模式为有一个专用走廊，试剂制备区，样品制备区，扩增区和产物分析区很规范的排列在一起。内实验室区域设为正压或常压状态，缓冲间内设为负压状态，使这三个区的空气流向由实验区域内向外，缓冲间内通向内实验室和走廊的门可安一种联锁装置，当一个门打开时，另一门必须关闭状态，防止出现两个门同时打开的情况。

  1.试剂制备区主要是扩增试剂的配制，分装盒保存。主要设备有天平、冰箱、离心机、加样器、紫外灯。

2.样品制备区主要是样品的混样和测试样品的制备。主要设备有冰箱、生物安全柜、离心机、加样器、振荡器、恒温水浴、上下水设备、废弃物容器、紫外灯。根据制备样品的性质和要求决定操作台是用生物安全柜、净化工作台、还是排毒柜，如疾控中心、临床医学实验室一般选用生物安全柜，植物转基因、检疫等可选排毒柜。

3.扩增区是pcr扩增反应体系的配制和模板的加入，核酸扩增。加样应在生物安全柜（超净工作台）内进行，超净工作台的气流方向宜选择垂直式。核酸扩增设备为冰箱、生物安全柜、离心机加样器、废弃物容器、紫外灯。

4.扩增产物分析区是扩增产物的测定。若实验仅采用全自动扩增检测仪，可将 区与扩增产物分析区合并为一个区。本区所使用的仪器设备有酶标仪、洗板机、加样器和水浴箱等。

各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、人流与气流，形成单向流程的保护屏障，避免实验室之间的相互干扰，防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。PCR实验室并没有严格的净化要求，但是为了避免各个实验区域间交叉污染的可能性，宜采用全送排的气流组织形式。

实验室的墙体，包括顶棚，应结构牢固、气密性好；所有阴角宜采用弧形线条过滤；墙体内壁光洁、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒；地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。地面建议使用PVC卷材地面或自流平地面，整体性好，便于进行清扫，耐腐蚀。

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